訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：非洲豬瘟病毒（ASFV）核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格：48T
編號(hào)：BH-P97031
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
DCN Others Human  Decorin / DCN / SLRR1B 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 瑞替加濱RetigabineHPLC>95%,

腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells(1ml)Ribavirin>99%,BR

IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) （）RibavirinHPLC>98%,

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3Ribostamycin Sulfate≥630µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

GLC-82-TK細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞 CL-0066COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2利福布丁Rifabutin >97%,BR
PBK Others Human  PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 芍藥苷（）>98%,分析Paeoniflorin

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(40%)≥40%Paeoniflorin

MCF-7細(xì)胞，癌細(xì)胞 肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)≥50%,BRPaeoniflorin

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild芍藥苷(90%)≥90%Paeoniflorin

PLAT Others Human  tPAβ 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
非洲豬瘟病毒（ASFV）核酸檢測(cè)試劑盒tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四，英文名或英文縮寫：DAB，級(jí)別：BR，85%，規(guī)格：100克

SGC-7901細(xì)胞，胃腺癌細(xì)胞 食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 失水蘋果1，英文名或英文縮寫：MA，級(jí)別：CP，規(guī)格：25克

腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。