訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：胡寧病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96486
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

長尾綠猴腎細(xì)胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide>99%,EP

TEK Others Human  Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯化鎂六水(分子生物學(xué))Magnesium chloride, hexahydrate>99%,分子生物學(xué)級

CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC

LX-2, 肝星形細(xì)胞株 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細(xì)胞 OK(負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞)神經(jīng)氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens≥10 units/ mg

腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLDL-α-羥基戊二酸二鈉98%,GC,進(jìn)分sigma 94577DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt

P388D1小鼠樣瘤細(xì)胞 P388D1 mouse lymphoid tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+90%馬血清+10%FBS地美溴胺>99%,BRDemecarium Bromide

IL12B Protein Human 重組 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)喹哪啶紅ARQuinaldine Red

腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 細(xì)胞名稱(98%)>98%Phenolphthalein

CM-R057大鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL四溴酚藍(lán)INDTetrabromophenol blue
胡寧病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）293T細(xì)胞，胚腎T細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞 心肌細(xì)胞裂解物HCML戈米辛D()＞98.0% (LC&T)，Gomisin D

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-11-甲基>98%1-Methyl Xanthine

IFNA5 Others Human  IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6-羧基-X-羅丹明>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2西侖吉肽>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 柴胡皂苷B2（）HPLC≥98%，Saikosaponin B2