公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

    a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。

     b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產品：

Phospho-NMDAR2A (Tyr1246)： 0酸化谷酸受體2A抗體 F11 Others Human 人 F11 / FXI 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0103Hep G2(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠羧肽酶B1(CPB1)ELISA試劑盒 IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II )  人白介素1可溶性受體Ⅱ 96T

NKG2D： NK細胞受體2D抗體 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]

RTE(大鼠氣管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 A375(人類惡性黑色素瘤) 大鼠羧肽酶A3(CPA3)ELISA試劑盒 RBP-4  大鼠結合蛋白4 96T

NRF-1： 核呼吸因子-1抗體 人肝癌細胞;Hep G2 [HepG2]

人結直腸癌細胞;T84 人白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒 ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原 0.5mg

IFI44： 干擾素誘導蛋白44抗體 人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照) 人白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒 OTR(oxytocin receptor)受體 0.5mg

ITPR3： 5-三0酸肌醇受體3抗體 人腦膜細胞HMC

CCL1 Protein Mouse 重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標簽) 人白介素15(IL-15)ELISA 試劑盒 OXR (Orexin receptor) 食欲素受體(多肽) 0.5mg

MDA-MB-436人乳腺癌細胞RCCD1： RCCD1蛋白抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3

CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠不對稱二甲基精酸(ADMA)ELISA試劑盒 MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1)  人骨髓抑制因子1 96T

phospho-RAD9(Ser328)： 0酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體 GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB ECD 人細胞裂解液 (陽性對照)

人毛細胞總RNAHHDPC NA 大鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒 ADP(Human adiponectin)  人脂聯素 96T

phospho-REC8(Ser251)： 0酸化減數分裂重組蛋白家族REC8抗體 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7